大鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测技术，微孔板固定纯化的大鼠IL-4特异性捕获抗体，加入不同浓度标准品及大鼠血清、细胞上清等待测样本，样本中的IL-4抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板净化后加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成夹心结构免疫复合物，经底物显色、终止反应后，测定吸光度值，根据标准曲线回归公式，精准定量大鼠样本中IL-4的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒

英文名称：IL-4 ELISA Kit
货号：Y-E1650

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.6pg/mL

检测范围：1pg/mL - 600pg/mL

反应时间：总时长3.5小时，标准孵育流程

保存条件：2-8℃低温保存，洗涤液室温保存

有效期：原装6个月，工作液当日配置当日使用

显色系统：HRP-TMB经典显色系统

检测波长：450nm/630nm双波长校正

标准曲线绘制：8梯度标准品，四参数回归拟合，曲线相关性优异

特异性：特异性识别大鼠IL-4，与Th2型其他细胞因子无显著交叉反应

重复性：板内CV≤6.8%，板间CV≤8.8%

注意事项：血清样本无需稀释可直接检测；孵育过程避免震动；洗板彻底，杜绝残留
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

室温平衡试剂 28min，稀释 IL-4 标准品，划分酶标板标准、样本、空白区域；

每孔加入 50μL 梯度标准品 / 大鼠血清，空白孔添加稀释缓冲液；

全部微孔加入 100μL 酶标记抗 IL-4 抗体，封板膜密封；

37℃孵育 60min，一步孵育生成免疫复合物；

洗板液浸泡微孔 30s，拍干，洗板 5 次；

避光添加显色底物混合液 100μL，37℃避光显色 14min；

终止液混匀，450nm 测 OD 值，计算样本 IL-4 表达水平。
公司正在出售的产品：