大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的大鼠IL-2特异性抗体包被于微孔板孔内，形成固相抗体，向孔内加入标准品、待测大鼠样本后，样本中的IL-2抗原与固相抗体特异性结合，再加入酶标记的抗大鼠IL-2抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心免疫复合物，充分孵育洗涤后去除未结合的游离成分，加入底物显色液进行显色反应，在酶的催化下底物产生有色产物，最后加入终止液终止反应，通过酶标仪测定对应波长下的吸光度值，吸光度值与样本中大鼠IL-2的含量呈正相关，结合标准曲线即可精准计算出样本中IL-2的含量
基本参数‌：

产品名称：大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒

英文名称：IL-2 ELISA Kit
货号：Y-E1651

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤1.0pg/mL

检测范围：2pg/mL - 800pg/mL

反应时间：整体反应时长约3.5小时（包被结合60min、孵育90min、显色15min）

保存条件：2-8℃低温避光保存，严禁冷冻

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月

显色系统：TMB双组分显色液，辣根过氧化物酶催化显色

检测波长：450nm（主波长）、630nm（参比波长）

标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，采用四参数Logistic拟合绘制标准曲线

特异性：特异性识别大鼠IL-2，与大鼠其他白介素、细胞因子无明显交叉反应

重复性：板内变异系数CV≤8%，板间变异系数CV≤10%

注意事项：实验所有耗材需无热源、无内毒素；标准品现配现用，稀释后不可留存；显色过程严格避光，终止后15分钟内完成上机检测
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：

样本、试剂盒室温平衡 30min，配制 IL-2 标准品梯度稀释液，预留空白孔、标准孔、待测样本孔并标记；

每孔同步加入 50μL 梯度标准品 / 待测大鼠血清 / 组织上清样本，空白孔加等量样本稀释液；

所有孔立即加入 100μL 辣根过氧化物酶标记 IL-2 一抗工作液，封板膜密封酶标板；

37℃恒温孵育 60min，使抗原抗体一步特异性结合；

撕去封板膜，弃去孔内液体，每孔加满洗涤缓冲液，静置 30s 后拍干，重复洗板 5 次；

每孔先后加入显色底物 A、B 液各 50μL，避光 37℃显色 15min；

每孔加 50μL 终止液终止显色，15min 内酶标仪 450nm 波长读取各孔 OD 值，对照标准曲线计算 IL-2 浓度。
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