小鼠血清/糖皮质激素调节激酶3(SGK3)重组蛋白 新品

小鼠血清/糖皮质激素调节激酶3(SGK3)重组蛋白参与盐离子稳态调控、应激应答、肿瘤增殖及肾脏代谢相关激酶活性分析实验。

型号：YS-DB1396

产品名称：小鼠血清/糖皮质激素调节激酶3(SGK3)重组蛋白

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 3 (SGK3)

CISK; SGKL; Cytokine-independent survival kinase; Serum/glucocorticoid-regulated kinase-like; Serine/threonine-protein kinase Sgk3

酶与激酶

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质, 外泌体

预测分子量：29.7kDa

实际分子量：30kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：His141~Glu368 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：9.1

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

特异性底物丝氨酸磷酸化比色检测：SGK3 磷酸化靶多肽底物，磷酸基团显色定量，测定激酶催化活性。

WB 特异性定性验证：SGK3 特异性抗体识别重组蛋白，条带分子量匹配理论分子量。

ATP 消耗生物发光定量检测：激酶消耗 ATP，剩余 ATP 荧光发光强度反向反映酶活力水平。

SDS-PAGE 电泳灰度纯度质控：灰度分析纯度，评估降解片段、杂蛋白、蛋白寡聚聚集污染。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。