小鼠亮氨酰tRNA合成酶2(LARS2)重组蛋白 新品

小鼠亮氨酰tRNA合成酶2(LARS2)重组蛋白用于线粒体翻译过程调控、线粒体脑病、氨基酸酰化酶活性体外测定实验。

型号：YS-DB2738

产品名称：小鼠亮氨酰tRNA合成酶2(LARS2)重组蛋白

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名称：Recombinant Leucyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (LARS2)

LEURS; Leucine tRNA Ligase 2,Mitocondrial; Leucyl-tRNA synthetase

酶与激酶

物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：36.6kDa

实际分子量：37kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Gln609~Glu902 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：6.7

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

氨酰化焦磷酸释放显色检测：LARS2 催化亮氨酸与对应 tRNA 氨酰化，释放焦磷酸，水解产生无机磷，钼蓝比色定量酶活。

WB 特异性抗原验证：LARS2 特异性抗体识别重组蛋白，条带分子量符合理论设计。

260nm 紫外 tRNA 消耗监测：tRNA 特征紫外吸收随反应消耗下降，吸光度降幅对应氨酰化反应速率。

SDS-PAGE 灰度纯度分析：计算蛋白纯度，检测蛋白降解、杂蛋白、聚集杂质。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。