土壤脱氢酶(SDHA)测试盒

土壤脱氢酶(SDHA)测试盒

产品介绍：

土壤脱氢酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤体系内活性微生物量以及其对有机物的降解活性，可以作为土壤微生物的降解性能指标。

测定原理：

氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在细胞呼吸过程中接受氢以后，被还原为三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈现红色，在波长485nm处有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm测定其吸光值，即得土壤脱氢酶活性。

自备实验仪器及用品：

筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、漏斗，滤纸、可见分光光度计、玻璃比色可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸馏水、丙酮（不允许快递，请用户自备）。

检测原理：

酶促反应原理：脱氢酶催化土壤有机质脱氢，氢转移至无色底物 TTC（2,3,5‑三苯基四氮唑氯化物）。

显色反应原理：TTC 接受氢被还原生成红色不溶于水的 TF（三苯基甲臜）；用有机溶剂萃取 TF。

光谱检测原理：TF 有机萃取液在 485 nm 波长测定吸光度。

定量计算原理：TF 标准品制作标准曲线；黑暗对照消除土壤本底还原干扰，TF 生成量表征脱氢酶活性。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

操作仪器预热：将可见分光光度计预热30min，调节波长至540nm，用蒸馏水调零标准曲线绘制：

取6支具塞刻度试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液（10mg/mL）

用蒸馏水补至1.0mL，再加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min

立即用流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值

以葡萄糖浓度（mg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定：

试剂名称(μL) 空白管 测定管

提取液/样本 100 100

试剂一 700 700

试剂二 100 100

混匀后37℃水浴30min，立即加入2.0mL显色工作液，沸水浴5min

流水冷却至室温，定容至25mL，摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定