人异戊烯半胱氨酸氧化酶1(PCYOX1)重组蛋白 新品

人异戊烯半胱氨酸氧化酶1(PCYOX1)重组蛋白用于蛋白法尼基修饰后加工代谢研究、衰老相关氧化代谢检测、脂质修饰相关体外酶学功能实验。

型号：YS-DB910

产品名称：人异戊烯半胱氨酸氧化酶1(PCYOX1)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Prenylcysteine Oxidase 1 (PCYOX1)

PCL1; Prenylcysteine lyase

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：溶酶体

预测分子量：67.3kDa

实际分子量：67kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Tyr174~Leu505 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：5.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

氧化裂解催化：PCYOX1 氧化切割异戊烯半胱氨酸末端异戊烯基团，生成醛类产物与半胱氨酸衍生物。

荧光显色产物检测：产物可耦联荧光探针，荧光强度与 PCYOX1 催化活性正相关。

免疫定量分析：ELISA 定量重组蛋白总浓度，WB 验证蛋白完整度。

氧依赖性对照：无氧条件下酶反应几乎终止，证明活性依赖氧化酶特征，排除非酶促反应。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。