人羧肽酶A5(CPA5)重组蛋白 新品

人羧肽酶A5(CPA5)重组蛋白开展多肽末端氨基酸水解、神经肽加工、组织发育调控体外底物筛选与酶活定量实验。

型号：YS-DB2634

产品名称：人羧肽酶A5(CPA5)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Carboxypeptidase A5 (CPA5)

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：-

实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg
检测原理：

多肽 C 端氨基酸切除酶活测定：以特异性合成多肽为底物，CPA5 水解释放游离氨基酸，色谱 / 显色法定量水解产物，计算酶活性。

亚型特异性免疫定量原理：CPA5 专属抗体特异性结合重组蛋白，夹心 ELISA 体系比色，换算蛋白浓度。

Western Blot 结构完整性检测：电泳转膜抗体杂交，匹配理论分子量，判定重组蛋白是否全长正确表达。

锌离子依赖活性佐证：锌离子为 CPA5 催化必需辅因子，去金属螯合处理后酶活丧失，排除其他蛋白酶干扰检测。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。