人ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白 新品

人ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白用于花生四烯酸释放、炎症脂质介质合成、炎症免疫应答及磷脂酶抑制剂体外筛选实验。

型号：YS-DB21

产品名称：人ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)

cPLA2delta; Cytosolic phospholipase A2 delta

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：42.8kDa

实际分子量：43kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Pro9~Leu120 with N-terminal His and GST Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

磷脂 sn-2 酯键特异性水解：PLA2G4D 切割磷脂二位酯键，释放游离脂肪酸与溶血磷脂，产物量测酶活。

荧光磷脂底物检测：荧光修饰磷脂酶切后荧光释放，荧光强度定量重组蛋白酶活力。

游离脂肪酸比色定量：脂肪酸显色反应测吸光度，换算重组 PLA2G4D 活性单位。

免疫鉴定重组蛋白纯度：特异性抗体验证蛋白表达、分子量与杂蛋白占比。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。