大鼠组织蛋白酶B(CTSB)重组蛋白 新品

大鼠组织蛋白酶B(CTSB)重组蛋白用于溶酶体水解活性检测、肿瘤侵袭转移、细胞凋亡、组织重塑及蛋白酶抑制剂筛选实验。

型号：YS-DB1218

产品名称：大鼠组织蛋白酶B(CTSB)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Cathepsin B (CTSB)

CTS-B; APPS; CPSB; APP secretase

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌, 溶酶体, 细胞外基质

预测分子量：23.9kDa

实际分子量：25kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Val129~Gln333 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 90%

等电点：5.7

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

半胱氨酸蛋白酶水解机制：CTSB 依赖巯基活化，水解羧基端精氨酸 / 赖氨酸肽键，切割荧光 / 发色多肽底物。

荧光底物灵敏检测：淬灭型荧光多肽酶切后荧光释放，荧光强度对应重组 CTSB 酶活力大小。

免疫学定量重组蛋白：特异性抗体 ELISA 定量蛋白浓度，WB 验证重组蛋白完整性与纯度。

特异性抑制剂对照：加入组织蛋白酶 B 抑制剂，扣除非特异水解，测得重组蛋白真实活性。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。