大鼠支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)重组蛋白 新品

大鼠支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)重组蛋白用于支链 α- 酮酸脱氢酶磷酸化调控、支链氨基酸代谢失衡及代谢综合征相关酶学机制研究。

型号：YS-DB965

产品名称：大鼠支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)

BCKDHKIN; 3-Methyl-2-Oxobutanoate Dehydrogenase/Lipoamide Kinase,Mitochondrial

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：24.5kDa

实际分子量：24kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Arg44~Thr223 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：9.0

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

BCKDK 特异性抗体靶向重组蛋白，免疫定性鉴定重组激酶蛋白。

BCKDK 磷酸化修饰支链 α- 酮酸脱氢酶复合体，检测靶蛋白磷酸化水平定量激酶活性。

BCA 总蛋白定量，归一化酶活数据。

底物空白、无关丝氨酸激酶对照，排除非特异性蛋白磷酸化干扰。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。