人B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)重组蛋白

商品属性：

型号：YS-DB1605

产品名称：人B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant B-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (BRAF)

B-raf 1; BRAF1; RAFB1; V-Raf Murine Sarcoma Viral Oncogene Homolog B1

酶与激酶

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞膜, 细胞核, 细胞质

预测分子量：33.4kDa

实际分子量：33kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ile457~Leu717 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：9.5

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
核心参数：

用于 BRAF 激酶活性检测、MEK 底物磷酸化实验、靶向抑制剂筛选及 MAPK 通路体外机制研究。
基础核心参数

基因 ID：673；Raf 家族激酶，分子量≈84 kDa；RAS-MAPK 通路核心分子，常见 V600E 致癌突变位点。

核心生物功能

MAPK 级联信号传导：接收 RAS 上游信号，磷酸化 MEK1/2，逐级激活 ERK1/2，调控细胞增殖、分化、存活与迁移。

肿瘤驱动突变：BRAF V600E 持续自激活，通路失控，是黑色素瘤、甲状腺癌、结直肠癌高频突变靶点，靶向抑制剂临床应用成熟。
复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。

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