大鼠博来霉素水解酶(BLMH)重组蛋白 新品

大鼠博来霉素水解酶(BLMH)重组蛋白用于肽酶水解活性测定、博来霉素药物解毒代谢、化疗药物敏感性相关机制研究实验。

型号：YS-DB1046

产品名称：大鼠博来霉素水解酶(BLMH)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Bleomycin Hydrolase (BLMH)

BH; BMH

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：n/a

预测分子量：21.6kDa

实际分子量：24kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Val30~Phe165  with N-terminal His Tag

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：-

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

纯度检测（SDS-PAGE）：电泳染色评估重组蛋白纯度完整性；

分子量验证：条带位置比对 Marker，核对 BLMH 理论分子量；

浓度定量（BCA 比色）：肽键还原 Cu²⁺显色，分光法定量蛋白浓度；

水解酶活检测：水解博来霉素酰胺键底物，产物色谱或显色定量测定金属蛋白酶水解活性。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。