rEndo S2糖苷酶/内切糖苷酶/糖苷内切酶

北京生夏蛋白技术有限公司/北京华利世
朱凯15810267201（手机微信）

rEndo S2 糖苷酶来源于化脓性链球菌，是一种IgG特异性内切糖苷酶，该酶在大肠杆菌中表达。该酶可特异性水解天然 IgG Fc GlcNAc之后的N-糖链，从而使u GlcNAc 保留或保留附着的岩藻糖残基。该酶可水解所有人类 IgG 亚类和许多其他物种的 IgG 的 Fc N-糖。用于研究抗体无岩藻糖基化水平；去糖基化抗体免疫亲和特性；N-糖链上核心岩藻糖缺乏的ADCC效应或在抗体Fc核心GlcNAcs的定点偶联ADC药物以及血清中IgG的岩藻糖化水平。

物理形态: 冻干粉含10mM PB (pH 7.4 at 25°C), 150mM NaCl

分子量: 92.5kDa.
存储条件: –20 °C冰箱冷冻.
保质期： 冻干粉–20°C保质期24 个月
溶解： 80ul水溶解
pH值范围: rEndo S2糖苷酶在pH7.4活性最佳

酶切方法:
-适用酶切缓冲溶液：20mmol PB or Tris 缓冲液;， pH值在7-8范围内
-IgG蛋白样品，按照200：1蛋白和蛋白酶的量使用，酶切反应蛋白浓度控制在1ug/ul, 37°C干浴孵育30min以上

质量控制 | Quality Control
纯度：液相色谱检测杂质蛋白质峰强度，rEndo S2糖苷酶色谱峰强度大于99.0%
专一性：在10 mM磷酸钠、150 mM NaCl、pH7.4于37°C下孵育30分钟，1ug rEndo S2可使500ug Bevacizumab抗体的核心GlcNAc糖去糖基化率≥ 98%
活性:500u/mg;单位定义:在pH7.4 PB溶液中，37°C孵育30分钟，一个单位可使1ug人IgG的去糖基化率≥ 98%
LC-MS/MS质谱分析:50ug Secukinumab抗体还原后加IdeS酶切孵育30min，然后分别加rEndo S2和rPNG ase F糖苷酶去糖基化,使用
QEHF质谱分析确认rEndo S2 糖苷酶的特异性