AP标记的小鼠抗人CD44单克隆抗体 新品

AP标记的小鼠抗人CD44单克隆抗体

原理特点

该抗体为小鼠源单克隆抗体，偶联碱性磷酸酶（AP）酶标记物，依靠碱性磷酸酶催化底物显色或发光的酶促反应实现信号检测。抗体特异性靶向人CD44黏附分子，CD44广泛参与细胞黏附、迁移、增殖及肿瘤侵袭转移过程，是肿瘤干细胞、浸润性肿瘤细胞的重要标志物。AP酶促反应背景低、信噪比高、显色稳定，相较于荧光标记不受光照淬灭影响，适用于免疫组化显色、原位检测及定量ELISA实验，可精准检测组织与细胞中CD44的表达水平。
英文名称:CD44 Mouse mAb, AP conjugated
中文名称:AP标记的小鼠抗人CD44单克隆抗体

标记物：AP 碱性磷酸酶，酶促显色标记（底物显色，无荧光淬灭）

靶蛋白：CD44（透明质酸受体，80–95kDa）

宿主：小鼠单克隆

种属：人

应用：ELISA、IHC 显色、斑点杂交、免疫印迹

蛋白功能：细胞黏附分子，肿瘤侵袭转移、干细胞、淋巴细胞归巢标志物

特点：酶标一抗可直接显色，无需二抗；不可冻存，2–8℃避光
靶点背景

1. CD44 是细胞表面黏附分子，广泛表达于多种体细胞、干细胞、肿瘤细胞表面

2. 介导细胞与透明质酸胞外基质黏附，调控细胞迁移、侵袭、干细胞干性维持

3. 肿瘤转移、侵袭研究常用标志物，也用于干细胞分选、免疫细胞迁移检测
样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。

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