自噬蛋白5/细胞凋亡的特异性蛋白抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:ATG5; APG 5; APG 5L; APG5; APG5 autophagy 5 like; APG5 like; APG5-like; APG5L; Apoptosis specific protein; Apoptosis-specific protein; ASP; ATG 5; ATG5; ATG5 autophagy related 5 homolog; Autophagy protein 5; hAPG5; Homolog of S Cerevisiae autophagy 5; ATG5_HUMAN.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human APG5L

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

理论分子量：32 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

靶向ATG5，是自噬体延伸的关键蛋白。它与ATG12共价结合形成ATG12-ATG5-ATG16L复合体，促进LC3脂化锚定在自噬体膜。该抗体用于研究自噬和细胞死亡。

靶点背景

自噬核心泛素化样系统组分，与 ATG12 共价结合形成复合物，介导 LC3 脂化、自噬膜延伸闭合。

连接自噬与凋亡通路；ATG5 剪切活化后可转位线粒体，启动线粒体介导细胞凋亡。

肿瘤双向调控：基础自噬抑癌，应激下 ATG5 介导保护性自噬帮助肿瘤抵抗放化疗。

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样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。