细胞信号转导分子SMAD3重组兔单抗 新品

细胞信号转导分子SMAD3重组兔单抗

原理特点

重组兔单抗形式，以高特异性和低背景识别SMAD3。它在ChIP和定量Western blot中表现优异，适用于研究SMAD3的DNA结合活性和转录调控功能，是TGF-β信号精准研究工具。
英文名称:Smad3 Recombinant Rabbit mAb
中文名称:细胞信号转导分子SMAD3重组兔单抗

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:hMAD 3; hSMAD3; HSPC193; JV15 2; JV152; MAD(mothers against decapentaplegic Drosophila) homolog 3; MAD3; MADH 3; MADH3; Mothers against decapentaplegic homolog 3; Mothers against DPP homolog 3; SMA and MAD related protein 3; SMAD 3; SMAD; SMAD-3; SMAD3_HUMAN.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:A synthesized peptide derived from human SMAD3

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Recombinant

克隆号：3D1

理论分子量：47 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景

重组兔单克隆批次稳定性极强，抗原结合活性均一，适合高通量药物筛选平台批量检测 p-SMAD3。

荧光多标兼容，可同时标记胞核 p-SMAD3 与胞质总 SMAD3，直观展示通路激活核转位效率。

极低非特异性背景，适用于微量原代细胞（原代成纤维、肾小管上皮）低丰度蛋白检测。
样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。

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