细胞色素c氧化酶IV亚型1（内参）单克隆抗体 新品

细胞色素c氧化酶IV亚型1（内参）单克隆抗体

原理特点

特异性识别COX IV亚型1，是核编码的线粒体蛋白，组成性表达稳定。它在Western blot中作为线粒体蛋白的内参对照，校正线粒体提取物的上样量差异。该单抗是线粒体功能研究的常用内参。
英文名称:COX4I1 Mouse mAb, Mitochondrial Loading Control
中文名称:细胞色素c氧化酶IV亚型1（内参）单克隆抗体

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:COX41_HUMAN; Cytochrome c oxidase subunit 4 isoform 1, mitochondrial; COX4; Cytochrome c oxidase polypeptide IV; Cytochrome c oxidase subunit IV isoform 1(COX IV-1); COX-IV; COX IV; COX 4; COX 4I1;

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Mouse

免疫原:Recombinant human COX4

亚型:IgG

性状:Size : 50ul/100ul/500ul LiquidSize : 200ug (PBS only) Lyophilized Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.

纯化方法:affinity purified by Protein G

克隆类型:Monoclonal

克隆号：8D8

理论分子量：17 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：Size : 50ul/100ul/500ul0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)0.01M PBS

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景

COX IV-1 核基因编码复合体 IV 调节亚基，线粒体管家蛋白，多数细胞稳定组成型表达，表达量几乎不受凋亡、增殖影响。

线粒体蛋白专属内参对照，WB/IF 校正线粒体上样量，区别于 GAPDH（胞质内参）、Histone（核内参）。

单抗特异性不识别 COX IV-2 亚型，心肌、骨骼肌高丰度稳定表达，适配线粒体分离样本定量实验。
核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。

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