细胞角蛋白5抗体
原理特点
CK5是复层上皮和肌上皮的基底细胞标志物,与CK14形成异二聚体。它在乳腺肌上皮、前列腺基底细胞和鳞状细胞癌中高表达。该抗体用于鉴别乳腺导管原位癌与浸润癌、前列腺良恶性病变,以及鳞癌与腺癌的区分。
英文名称:Cytokeratin 5 Rabbit pAb
中文名称:细胞角蛋白5抗体

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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:Cytokeratin 5; Keratin, type II cytoskeletal 5; CK-5; CK5; Keratin-5; K5; 58 kDa cytokeratin; KRT5; CK 5; DDD; EBS 2; EBS2; K5; Keratin 5(epidermolysis bullosa simplex Dowling-Meara/Kobner/Weber-Cockayne types); Keratin 5; Keratin Type II Cytoskeletal 5; Keratin5; KRT 5; KRT 5A; KRT5.
交叉反应:Human,Mouse,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cytokeratin 5
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:64 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
CK5 为碱性 II 型角蛋白,表达于复层上皮基底干细胞、肌上皮细胞、间皮细胞,单层腺上皮弱表达。
乳腺病理分型关键:三阴性基底型乳腺癌 CK5 强阳性;腔型乳腺癌 CK5 阴性;鉴别乳腺肌上皮良性增生与浸润癌。
肺鳞癌、间皮瘤普遍 CK5 阳性,肺腺癌阴性,辅助区分肺部鳞癌 / 腺癌 / 恶性间皮瘤。
样本处理标准流程
1. 细胞样本制备
洗涤:用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次,避免用力冲洗导致细胞脱落。
固定与通透:4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟;如需检测胞内蛋白,用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。
封闭:用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟,减少非特异性结合。
2. 组织样本制备
石蜡切片:依次放入二甲苯(2次,每次10分钟)、梯度乙醇(100%→95%→80%→70%,各5分钟)脱蜡水化;柠檬酸缓冲液(pH6.0)热修复10-15分钟,自然冷却至室温。
新鲜组织:取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时,或-80℃冷冻保存;冷冻切片厚度控制在5-10μm,贴片后自然干燥30分钟。
3. WB蛋白样本制备
用RIPA裂解液(含1% PMSF和磷酸酶抑制剂)冰上裂解细胞30分钟,12000rpm离心15分钟取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白浓度,调整至上样量一致;加入5×SDS上样缓冲液,95℃加热5-10分钟变性,-20℃保存备用。
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