细胞核因子/k基因结合核因子抗体 新品

细胞核因子/k基因结合核因子抗体

原理特点

检测NF-κB p65总蛋白水平。NF-κB的持续激活与慢性炎症、自身免疫病和多种肿瘤密切相关。该抗体广泛用于评估炎症通路激活、药物抗炎效果和肿瘤NF-κB依赖性存活机制。
英文名称:NFKB p65 Rabbit pAb
中文名称:细胞核因子/k基因结合核因子抗体

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:TF65_HUMAN; Transcription factor p65; RELA; Nuclear factor NF-kappa-B p65 subunit; Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells 3; NFKB3; RELA proto-oncogene, NF-kB subunit; p65; CMCU; NFKB3; AIF3BL3; NF-kB p65/RelA; NFκB-p65; NFκB p65; NF κB-p65; NFκBp65;

交叉反应:Human,Mouse

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human NFKBp65

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

克隆号：None

理论分子量：61 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景

识别 NF-κB 家族保守结构域，覆盖 p65、p50、p52、c-Rel、RelA 全部亚基总蛋白水平。

统一检测细胞内全部 NF-κB 储备总量，对比刺激前后总蛋白变化，搭配 p65 活化型抗体区分总量与激活量。

适用于初筛通路是否整体上调，快速判断模型是否存在 NF-κB 通路整体扰动。
样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。

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