溶质载体家族蛋白32成员A1抗体 新品

溶质载体家族蛋白32成员A1抗体

原理特点

溶质载体家族32成员A1为特异性氨基酸转运蛋白，主要介导甘氨酸等小分子氨基酸的跨膜摄取与转运，参与神经递质调控、细胞能量代谢与氨基酸稳态维持。该抗体可特异性结合该转运蛋白靶位点，精准检测蛋白表达分布与活化状态，评估细胞氨基酸摄取代谢能力；同时可阻断其氨基酸转运功能，导致胞内氨基酸代谢失衡，干扰细胞正常增殖与信号调控，适用于代谢紊乱、神经功能异常相关机制研究。
英文名称:SLC32A1 Rabbit pAb
中文名称:溶质载体家族蛋白32成员A1抗体

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:bA122O1.1; GABA and glycine transporter; hVIAAT; SLC32A 1; Slc32a1; solute carrier family 32(GABA vesicular transporter) member 1; Solute carrier family 32 member 1; Vesicular GABA Amino Acid Transporter; Vesicular GABA transporter; Vesicular inhibitory amino acid transporter; VGAT; VIAAT; VIAAT_HUMAN.

交叉反应:Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human SLC30A9

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

理论分子量：57 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景

靶点背景：囊泡谷氨酸转运体 VGLUT1，将谷氨酸转运入突触囊泡，中枢兴奋性神经递质释放核心载体。

作用原理：胞外亲水环多肽免疫，专一识别突触前膜转运蛋白。

产品特点：脑组织荧光清晰标记兴奋性突触；癫痫、神经退行性疾病、突触可塑性研究工具。
样本处理与实验操作

1. Western Blot（免疫印迹）

样本制备

细胞样本：PBS洗涤2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂），冰上裂解30分钟，12000rpm离心15分钟取上清，BCA法定量蛋白浓度

组织样本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，离心后取上清，调整蛋白浓度至一致

变性处理：加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟，冷却后上样

抗体孵育

转膜完成后，用5% BSA或牛奶封闭液室温封闭1-2小时

一抗稀释后4℃孵育过夜（12-16小时），或室温孵育1-2小时；孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中

TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟；加入二抗（1:5000-1:10000稀释）室温孵育1-2小时

再次洗涤后，用ECL发光液显影，通过凝胶成像系统采集图像

2. IHC-P（石蜡切片免疫组化）

样本前处理

脱蜡水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分钟），最后用PBS冲洗

抗原修复：将切片放入柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）中，微波炉加热至沸腾，保持10-15分钟，自然冷却至室温

封闭处理：3% H₂O₂室温孵育10分钟灭活内源性过氧化物酶，PBS冲洗后用10%山羊血清封闭30分钟

抗体孵育

一抗稀释后滴加在切片上，4℃孵育过夜；孵育时置于湿盒中，防止液体挥发

次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟；加入二抗（生物素标记）室温孵育30分钟

PBS冲洗后，加入ABC复合物室温孵育30分钟，DAB显色剂显色（显微镜下观察控制时间，通常3-10分钟），苏木素复染后脱水封片

3. ICC/IF（细胞免疫荧光）

样本制备

细胞爬片培养至70-80%汇合度，PBS洗涤2次，4%多聚甲醛固定15-20分钟

通透处理（根据抗体类型选择）：0.1% Triton X-100室温孵育10分钟，PBS冲洗3次

封闭处理：5% BSA室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合

抗体孵育

一抗稀释后滴加在爬片上，4℃孵育过夜，或室温孵育1-2小时

PBS冲洗3次，每次5分钟；加入荧光标记二抗（1:200-1:500稀释），室温避光孵育30-60分钟

再次冲洗后，用抗淬灭封片液封片，荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察采集图像

4. ELISA（酶联免疫吸附试验）

包被与封闭

用包被缓冲液（如碳酸盐缓冲液pH9.6）稀释抗原至合适浓度，每孔加入100μl，4℃包被过夜

弃去包被液，PBST洗涤3次，每次3分钟；加入封闭液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小时

抗体孵育

一抗按比例稀释后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小时，或4℃孵育过夜

PBST洗涤3次，加入稀释好的酶标二抗，每孔100μl，37℃孵育1小时

洗涤后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光显色10-20分钟，加入终止液（2M H₂SO₄），用酶标仪在450nm波长读取OD值

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