穿膜蛋白DLK1抗体（C端） 新品

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商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:Adipocyte differentiation inhibitor protein; Brevideltin; delta like 1 homolog; delta like homolog; delta like protein; delta1; DLK 1; DLK; DLK-1; Dlk1; DLK1_HUMAN; FA 1; FA1; Fetal antigen 1; pG2; Preadipocyte factor 1; Pref 1; Pref; Pref1; Pref-1; Protein delta homolog 1; Secredeltin; ZOG; delta1; PREF1.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from sheep DLK1

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

理论分子量：42 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该抗体是靶向DLK1蛋白C端特异性抗原表位的靶向抗体，仅特异性识别DLK1蛋白C端结构域，精准区分完整DLK1蛋白与截断突变体。DLK1是跨膜 Notch 信号调控蛋白，参与胚胎发育、干细胞分化、肿瘤增殖调控，该抗体核心特点为端位识别精准、特异性极高，可精准定位细胞膜及胞内DLK1蛋白，无非特异性结合，灵敏度优异，适配WB、IHC、IF实验，专门用于研究DLK1蛋白C端功能、蛋白剪切修饰及信号通路调控机制。

靶点背景

蛋白特性：穿膜蛋白DLK1是Notch信号通路的负调控因子，通过结合Notch受体，抑制Notch信号传导，调控细胞分化和增殖。

组织发育：DLK1在胚胎发育过程中高表达，参与造血干细胞、神经干细胞的分化调控，出生后其表达水平降低，其功能异常可导致发育畸形和疾病。

肿瘤关联：DLK1在多种肿瘤中高表达，如神经母细胞瘤、肺癌、乳腺癌等，参与肿瘤细胞的增殖和侵袭，其抗体可用于研究肿瘤的发病机制，开发靶向DLK1的抗肿瘤药物。

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核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。