成纤维细胞激活蛋白α抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:Prolyl endopeptidase FAP; FAPA; Fibroblast activation protein, alpha; 170 kDa melanoma membrane bound gelatinase; 170 kDa melanoma membrane-bound gelatinase; DPPIV; Fibroblast activation protein alpha; Integral membrane serine protease; SEPR_HUMAN; 170 kDa melanoma membrane-bound gelatinase; Dipeptidyl peptidase FAP; FAPalpha; Gelatine degradation protease FAP; Integral membrane serine protease; Post-proline cleaving enzyme; Serine integral membrane protease; SIMP; Surface-expressed protease; Seprase; Antiplasmin-cleaving enzyme FAP, soluble form; APCE.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human FAPA

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Polyclonal

理论分子量：88 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该抗体靶向成纤维细胞激活蛋白α（FAP-α），通过特异性抗原抗体结合，专一性识别活化成纤维细胞表面的FAP-α膜蛋白。FAP-α是肿瘤微环境、组织纤维化中活化成纤维细胞的特异性标志物，具备蛋白酶活性，参与组织重塑与肿瘤侵袭转移。该抗体核心特点为靶向活化成纤维细胞特异性高，不识别静息成纤维细胞，灵敏度优异，可精准检测组织中FAP-α表达水平，适配免疫组化、免疫荧光、流式检测，广泛用于肿瘤微环境、器官纤维化、创面修复机制研究。

靶点背景

肿瘤微环境：成纤维细胞激活蛋白α（FAPα）主要表达于肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）表面，可降解细胞外基质蛋白，促进肿瘤细胞侵袭和转移，参与肿瘤微环境重构。

肿瘤诊断：FAPα在多种实体瘤（如胰腺癌、结直肠癌、乳腺癌）的CAFs中高表达，可作为肿瘤诊断的生物标志物，其抗体可用于肿瘤的成像诊断和术中导航。

治疗潜力：靶向FAPα的抗体药物或CAR-T细胞治疗可特异性清除CAFs，抑制肿瘤生长和转移，目前已有相关药物进入临床试验阶段，用于治疗晚期实体瘤。

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核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。