波形蛋白单克隆抗体 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:FLJ36605; OTTHUMP00000019224; VIM; VIME_HUMAN; Vimentin.

交叉反应:Human

抗体来源:Mouse

免疫原:Recombinant human Vimentin Protein

亚型:IgG

性状:Size : 50ul/100ul/200ul <br/> Liquid<br/><br/>Size : 200ug (PBS only) <br/> Lyophilized<br/> Note: Centrifuge tubes before opening. Reconstitute the lyophilized product in distilled water. Optimal concentration should be determined by the end user.

纯化方法:affinity purified by Protein G

克隆类型:Monoclonal

克隆号：3B7

理论分子量：53 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：Size : 50ul/100ul/200ul<br/>0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.Size : 200ug (PBS only)<br/>0.01M PBS

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该单克隆抗体通过单一B细胞克隆技术制备，特异性靶向波形蛋白（Vimentin），该蛋白是中间丝骨架核心蛋白，特异性表达于间充质来源细胞，参与细胞形态维持、迁移、侵袭及上皮间质转化进程。抗体仅识别波形蛋白特异性抗原表位，不与肌动蛋白、微管蛋白等骨架蛋白交叉反应，批次均一性极强。核心特点是纯度高、特异性极致、重复性优异、非特异性结合极低，可精准检测波形蛋白的表达水平与细胞骨架定位，适配高精度上皮间质转化研究、肿瘤侵袭转移机制、组织分化鉴定及细胞损伤修复实验。

靶点背景

细胞骨架蛋白：波形蛋白（Vimentin）是中间丝蛋白家族成员，主要表达于间充质来源的细胞，参与细胞骨架构建、细胞形态维持和细胞运动，对维持细胞机械稳定性和信号传导至关重要。

肿瘤转移：波形蛋白在多种上皮来源肿瘤中高表达，与上皮间质转化（EMT）相关，促进肿瘤细胞迁移和侵袭，其表达水平与肿瘤的恶性程度和转移能力密切相关。

临床应用：可作为肿瘤诊断和预后评估的生物标志物，其单克隆抗体也可用于肿瘤的免疫组化检测，区分上皮性和间质性肿瘤，还可作为研究工具用于细胞骨架和EMT机制研究。

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样本处理标准流程

1. 细胞样本制备

洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。

固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。

封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。

2. 组织样本制备

石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。

新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。

3. WB蛋白样本制备

用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。

BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。