产品属性

产品名称 | 表皮生长因子抗体 | 货号 | YS-K6701 |
英文名称 | EGF Rabbit pAb | 用途 | 仅供科研实验 |
商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:beta urogastrone; Epidermal Growth Factor; Pro epidermal growth factor; URG; Urogastrone; EGF; EGF_HUMAN; Epidermal Growth Factor; HOMG4; OTTHUMP00000219721; OTTHUMP00000219722; Pro epidermal growth factor; URG; Urogastrone.
交叉反应:Human
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human EGF
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:5.8/133 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特点

该抗体特异性靶向表皮生长因子(EGF),EGF是调控细胞增殖、分化、迁移的核心生长因子,主导上皮组织修复、器官发育及肿瘤增殖进程。抗体可精准识别EGF特异性抗原表位,高效结合样本中游离态与结合态EGF蛋白。核心特点是亲和力强、灵敏度高、特异性专一,可定量检测EGF的表达与分泌水平,广泛应用于细胞增殖调控、组织修复机制、肿瘤生长调控及靶向药物筛选研究。
靶点背景

生长因子功能:表皮生长因子(EGF)是一种小分子多肽,主要由上皮细胞、成纤维细胞分泌,通过结合EGF受体(EGFR),激活Ras-MAPK、PI3K-Akt等信号通路,促进细胞增殖、分化和迁移,参与组织修复和器官发育。
肿瘤调控:EGF在肿瘤微环境中高表达,可通过激活EGFR信号通路,促进肿瘤细胞增殖、侵袭和血管生成,抑制细胞凋亡,与多种肿瘤的发生发展密切相关,是肿瘤治疗的重要靶点。
临床应用:EGF抗体可用于检测EGF水平、研究肿瘤发病机制和开发靶向治疗药物,同时EGF也可作为生物药物,用于烧伤、溃疡等
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核心实验操作方法

1. Western Blot(WB)
抗体孵育
一抗孵育:用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度(如1:1000),4℃摇床缓慢孵育过夜;或室温孵育1-2小时,孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤:用TBST缓冲液洗涤3次,每次5分钟,洗去未结合的一抗;加入HRP标记二抗(1:5000-1:10000稀释),室温孵育1小时。
显影:再次洗涤后,加入ECL发光液孵育1-2分钟,用化学发光成像仪采集图像,根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化(IHC)
抗体孵育
一抗孵育:滴加稀释后的一抗(如1:200)于组织切片上,置于湿盒中4℃孵育过夜;次日室温复温30分钟,PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入生物素标记二抗(1:200)室温孵育30分钟,PBS冲洗后加入ABC复合物(1:100)室温孵育30分钟。
显色封片:DAB显色剂显色3-10分钟(显微镜下观察控制时间),苏木素复染1分钟,梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光(IF)
抗体孵育
一抗孵育:用5% BSA稀释抗体至工作浓度(如1:100),滴加在细胞爬片上,4℃避光孵育过夜;室温复温后PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入荧光标记二抗(如FITC标记抗兔IgG,1:200),室温避光孵育30-60分钟;PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察:荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察,激发波长根据二抗标记物选择(如FITC为488nm)。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被:用包被缓冲液(pH9.6碳酸盐缓冲液)稀释抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育:弃去包被液,PBST洗涤3次,加入5% BSA封闭液200μl/孔,37℃孵育1小时;加入稀释后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测:洗涤后加入酶标二抗(1:5000),37℃孵育1小时;TMB底物溶液显色10-30分钟,2M硫酸终止反应后,酶标仪450nm波长读取OD值。