半胱胺酸蛋白酶蛋白-3重组兔单抗 新品

产品属性

商品介绍

产品应用:

Not yet tested in other applications.

Optimal working dilutions must be determined by the end user.

英文别名:cleaved Caspase 3; cleaved Caspase-3; APOPAIN; CASP3; Caspase 3 apoptosis related cysteine protease; Caspase3; CPP32; CPP32B; Cysteine protease CPP32; Human cysteine protease CPP32 isoform alpha mRNA complete cds; PARP cleavage protease; SCA 1; SCA1; SREBP cleavage activity 1; Yama; CASP3_HUMAN; Caspase-3; CASP-3; Apopain; Protein Yama; SREBP cleavage activity 1; SCA-1.

交叉反应:Human,Mouse,Rat

抗体来源:Rabbit

免疫原:A synthesized peptide derived from human Caspase 3

亚型:IgG

性状:Liquid

纯化方法:affinity purified by Protein A

克隆类型:Recombinant

克隆号：4D2

理论分子量：32 kDa

浓度：1mg/ml

储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.

注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

原理特点

该重组兔单克隆抗体通过基因重组工程技术制备，特异性靶向Caspase-3特异性抗原表位，基因序列明确、无杂克隆污染，相较于普通抗体纯度更高、特异性更强。抗体可精准捕捉微量活化的Caspase-3蛋白，严格规避家族同源蛋白干扰。核心特点是均一性极佳、无批次差异、非特异性结合极低、灵敏度远超常规抗体，适用于高精度凋亡定量检测、临床病理样本分析、靶向凋亡药物研发及精细化机制验证实验。

靶点背景

抗体优势：通过重组兔单抗技术制备，具有高特异性、高亲和力和批次间一致性好的优点，可精准识别Caspase-3的不同活性形式（酶原、激活形式），确保检测准确性和可靠性。

实验优化：重组兔单抗适用于多种实验方法，如Western Blot、ELISA、免疫组化等，可高效检测组织和细胞中Caspase-3的表达水平和活化状态，减少非特异性结合和背景干扰。

应用场景：用于细胞凋亡机制研究、肿瘤发病机制研究、药物筛选和疗效评估，也可作为科研工具，深入探讨Caspase-3在多种疾病中的作用。抗体优势：通过重组兔单抗技术制备，具有高特异性、高亲和力和批次间一致性好的优点，可精准识别Caspase-3的不同活性形式（酶原、激活形式），确保检测准确性和可靠性。

实验优化：重组兔单抗适用于多种实验方法，如Western Blot、ELISA、免疫组化等，可高效检测组织和细胞中Caspase-3的表达水平和活化状态，减少非特异性结合和背景干扰。

应用场景：用于细胞凋亡机制研究、肿瘤发病机制研究、药物筛选和疗效评估，也可作为科研工具，深入探讨Caspase-3在多种疾病中的作用。

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核心实验操作方法

1. Western Blot（WB）

抗体孵育

一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。

洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。

显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。

2. 免疫组化（IHC）

抗体孵育

一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。

显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。

3. 免疫荧光（IF）

抗体孵育

一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。

二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。

观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。

4. ELISA实验

包被与孵育

包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。

封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。

检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。