人微管相关蛋白轻链3B(LC3B)elisa试剂盒

自噬过程标志性蛋白，结合细胞微管结构，介导细胞自噬体形成、胞内破损物质降解清除，维持细胞内部环境稳态，蛋白表达水平直接反映细胞自噬激活程度，关联衰老、损伤、肿瘤病变，广泛用于细胞自噬相关样本检测。

夹心法数据：

以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。

夹心法标曲：

核心参数：

- 检测原理：双抗体夹心ELISA法，捕获靶蛋白后酶促显色定量

- 种属反应性：专一识别人源LC3B蛋白

- 检测时间：2.5～3h

- 保存条件：2～8℃阴凉密封保存，避免反复冻融

- 特异性：无其他微管相关蛋白轻链亚型交叉反应

- 板内/板间变异系数：板内CV≤8%，板间CV≤10%
试剂准备:

平衡：所有试剂回温至室温（20–25℃）。

洗涤液（1×）：30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水，混匀，2–8℃可存 1 个月。

标准品稀释：

每瓶标准品加1 mL稀释液，静置 15 min，轻柔混匀（避免气泡），得最高浓度 S7。

准备 7 个 EP 管，各加250 μL稀释液，倍比稀释：

S7：原液（如 160 μg/L）

S6：250 μL S7 + 250 μL 稀释液

S5 至 S1 依次稀释

S0：稀释液（空白对照）

生物素化抗体（1×）：按 1:100 稀释（如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液），现配现用。

SAV‑HRP（1×）：按 1:100 稀释，现配现用，避光。

常见问题

高背景：洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。

标准曲线线性差：标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。

样品值偏低：样品降解、稀释倍数过高、加样误差。

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