隐孢子虫/蓝氏贾第鞭毛虫(CT/GL)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒是针对水源及畜禽体内常见致病原的双重核酸检测产品，可特异性检测隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫两类寄生性原虫核酸。两类原虫均为重要的人畜共患病原，主要通过水源、饲料传播，易引发畜禽肠道疾病及人畜交叉感染，常规镜检检出率低、误差大。本试剂盒依托核酸检测技术，灵敏度高、特异性好，可精准检出样本中低浓度病原，适用于养殖用水水质检测、畜禽粪便样本筛查、畜禽肠道疫病溯源、公共养殖环境安全监测等场景，能够高效排查原虫感染及环境污染隐患，保障畜禽养殖安全和公共卫生安全。

基础原理：

双重荧光定量 PCR 寄生虫核酸检测原理，分别靶向隐孢子虫 18S rRNA 基因、蓝氏贾第鞭毛虫 β- 微管蛋白保守序列，特异性扩增虫体核酸实现同步检出。

反复冻融 + 珠磨破碎裂解体系，破坏寄生虫厚卵囊壁，释放内部核酸，解决常规裂解无法破碎卵囊导致的检出灵敏度低问题。

外源合成 DNA 内参全程质控，监控粪便样本中胆汁、食物残渣等抑制物对扩增的干扰，保证检测结果可靠。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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