猪细小病毒/伪狂犬野毒/圆环型三重核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒为猪群常见病毒性疫病三重联合检测产品，可同步检测猪细小病毒、猪伪狂犬野毒、猪圆环病毒三类高发病原核酸。这三类病毒是导致猪群繁殖障碍、仔猪免疫力低下、生长迟缓、隐性带病的主要病原，且临床症状高度相似、易混合感染。本产品实现一管检测三类病原，大幅提升检测效率，适用于种猪繁育群筛查、仔猪健康检测、猪场疫病综合排查、引种检疫等场景，可快速明确猪群发病诱因，精准区分单一感染与混合感染，为猪场繁殖障碍性疫病综合防控、种群健康净化提供高效精准的分子检测方案。

基础原理：

三重荧光定量 PCR 同步扩增原理，细小病毒、圆环病毒为 DNA 病毒，伪狂犬野毒靶向 gE 缺失基因位点，三套 DNA 特异性引物探针三色荧光同步检测，区分三种 DNA 病原。

碱裂解法快速释放细胞 DNA，中和缓冲液快速调节 pH 值，避免强酸强碱降解环状病毒 DNA，简化组织样本核酸提取步骤。

宿主基因组内源内参同步扩增，监测组织样本 DNA 提取效率，避免因核酸提取不足造成圆环、细小低拷贝样本假阴性。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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