猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒通用型（CSFV/PRRSV-U)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒为猪瘟与普通型猪蓝耳病双重检测试剂，可同步筛查两种生猪核心高发病毒性疫病，快速判定单一感染与混合感染情况。操作简便、检测周期短、结果稳定，适配规模化猪场日常疫病筛查、发病猪只诊断、引种检疫及养殖环境疫病风险监测。

基础原理：

分别设计猪瘟病毒、猪蓝耳病通用型病毒特异性引物探针，通过双重实时荧光PCR同步扩增两种病毒核酸，实现两类猪核心疫病联合检测。

两种病毒基因组序列差异显著，引物探针特异性互不交叉，可同时筛查猪瘟与蓝耳病病毒，精准识别单一感染与混合感染。

提取猪临床样本病毒核酸后，通过双重PCR体系富集两种微量病毒核酸，依托荧光信号变化，快速完成猪瘟、蓝耳病的同步筛查。

‌操作步骤‌：

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。

2. 标准曲线制备（独立操作区）

标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。

取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。

3. PCR反应体系配制（试剂配制区）

按以下比例配制（示例）：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| DEPC水 | 6 |

4. 上机检测

程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。

‌注意事项‌：

1、实验分区管理‌

实验全程需严格划分三个独立区域：‌试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区‌，各区实验服、移液器及耗材‌严禁混用‌，防止交叉污染。

‌2、防止污染操作‌

使用带滤芯枪头，每步更换枪头；

阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；

加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。

‌3、试剂保存与使用‌

所有试剂需‌-20℃避光保存‌，避免反复冻融，确保稳定性；

使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。

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