小反刍兽疫病毒野毒株(PPRV-W)核酸检测试剂盒

‌产品名称：小反刍兽疫病毒野毒株(PPRV-W)核酸检测试剂盒

英文名称：Peste Des Petits Ruminants Virus Wild Strain (PPRV-W) Nucleic Acid Detection Kit

货号：YS-P015468

分类：核酸检测试剂盒

规格‌：50T/盒

检测原理：
N 核蛋白基因野毒特异性 RT-qPCR，区分基因缺失疫苗株与自然野毒株，靶向野毒完整 N 基因序列设计探针。

双重靶标鉴别扩增，同步扩增 PPRV 通用 M 基因内参与野毒特异性 N 片段，双阳性判定野毒感染羊群。

巢式 RT-PCR 低载量富集原理，隐性潜伏感染羊口鼻拭子经两轮扩增，提升低排毒样本检出灵敏度。
实验流程：
1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

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注意事项：
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。