麦ubiquitine 基因核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒以小麦专属ubiquitine内源基因为检测靶点，可精准定性检测各类小麦原粮、面粉、面制品、饲料、复合粮食原料中的小麦源性成分。检测体系稳定、特异性优异，可有效规避水稻、玉米、大豆等作物的基因干扰，适用于小麦原料溯源、面制品成分核查、粮食掺假检测及相关核酸检测实验的内控质控。

基础原理：

以小麦专属ubiquitine内源保守基因为检测靶点，设计特异性引物探针，通过实时荧光PCR扩增该基因核酸，判定样本中小麦源性成分。

ubiquitine基因在小麦中高度保守、稳定表达，其他谷物无相同序列特征，可作为小麦核酸检测的特异性内参，保障小麦成分鉴别精准度。

提取样本总核酸后，通过PCR特异性富集小麦ubiquitine基因核酸，结合荧光实时检测技术，实现小麦源性成分的定性检测与实验体系校验。

‌操作步骤‌：

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。

2. 标准曲线制备（独立操作区）

标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。

取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。

3. PCR反应体系配制（试剂配制区）

按以下比例配制（示例）：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| DEPC水 | 6 |

4. 上机检测

程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。

‌注意事项‌：

试剂盒含生物源性质粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，阳性模板仅在生物安全柜开盖；

所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃；

试剂避免反复冻融，单次融化冰上放置不超过 2 h，使用完毕立即放回 - 20℃；

移液器吸头一次性使用，禁止重复吸取，防止交叉污染；

试剂盒仅用于科研检测，严禁人临床体外诊断；

扩增产物区产物不可带回试剂、提取区，防止气溶胶大面积污染实验室；

若阴性对照持续出现杂带，全部更换全新试剂盒，实验室台面、移液器紫外过夜消毒。

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