高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)核酸检测试剂盒 新品

‌产品名称：高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV-M)核酸检测试剂盒

英文名称：High Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (PRRSV-M) Nucleic Acid Detection Kit

货号：YS-P015427

分类：核酸检测试剂盒

规格‌：50T/盒

检测原理：
NSP2 缺失突变区特异性荧光 RT-qPCR，高致病株存在 NSP2 基因天然缺失片段，引物仅扩增突变缺失区域，区分普通蓝耳与高致病性毒株。

双重靶标鉴别扩增原理，同步扩增 PRRSV 通用 ORF7 基因与高致病特异性 NSP2 缺失片段，ORF7 阳性证明病毒存在，双阳性判定高致病性毒株。

熔解曲线分型荧光 PCR，扩增 NSP2 片段后通过熔解温度差异，区分经典蓝耳、高致病蓝耳病毒，无需凝胶电泳。
实验流程：
1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

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注意事项：
避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。