转基因大豆MON品系核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒针对转基因大豆MON品系特异性插入基因序列研发，是品系特异性转基因检测试剂，可精准定性检测大豆原料、大豆制品、粮油食品、饲料等样品中的MON品系转基因大豆成分。能够精准区分MON品系与其他转基因大豆品系及非转基因大豆，特异性、灵敏度极高，是转基因大豆精准溯源、专项筛查、市场监管的专用检测产品。

基础原理：

针对转基因大豆MON品系特异性外源插入序列设计引物探针，通过实时荧光PCR精准扩增MON品系特征核酸片段，特异性鉴别该品系转基因大豆成分。

依托MON品系转基因大豆独有的插入位点序列特征，引物仅靶向该品系靶标核酸，不与普通大豆、其他品系转基因大豆发生交叉反应，检测特异性强。

纯化大豆样本基因组核酸，通过PCR指数扩增技术放大MON品系特异性靶标信号，结合荧光定量检测，实现微量MON品系转基因大豆成分的检出。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

1、实验分区管理‌

实验全程需严格划分三个独立区域：‌试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区‌，各区实验服、移液器及耗材‌严禁混用‌，防止交叉污染。

‌2、防止污染操作‌

使用带滤芯枪头，每步更换枪头；

阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；

加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。

‌3、试剂保存与使用‌

所有试剂需‌-20℃避光保存‌，避免反复冻融，确保稳定性；

使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。

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