EB病毒(EBV)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒基于荧光PCR扩增原理，靶向EB病毒保守基因设计检测体系，可检测外周血、咽拭子、淋巴组织样本中的EB病毒核酸。EB病毒与传染性单核细胞增多症、淋巴瘤、鼻咽癌等疾病密切相关，试剂盒检测精准度高、重复性好，可定量辅助判断病毒载量，适用于临床感染诊断、肿瘤辅助筛查、免疫力低下人群监测及病毒相关疾病预后评估。

基础原理：

靶向 EBV BamHI-W 重复多拷贝基因，qPCR 扩增提升灵敏度，精准定量外周血、淋巴细胞内病毒拷贝数。

全血分离淋巴细胞，裂解细胞释放细胞核内 EBV 游离核酸，柱提法纯化去除血红蛋白。

人 GAPDH 管家基因作为内参，校正细胞采集量差异，标准化病毒载量数值用于临床对比。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

1、实验分区管理‌

实验全程需严格划分三个独立区域：‌试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区‌，各区实验服、移液器及耗材‌严禁混用‌，防止交叉污染。

‌2、防止污染操作‌

使用带滤芯枪头，每步更换枪头；

阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；

加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。

‌3、试剂保存与使用‌

所有试剂需‌-20℃避光保存‌，避免反复冻融，确保稳定性；

使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。

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