人星状病毒(HastV)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒基于实时荧光PCR技术，靶向人星状病毒特异性保守基因设计检测靶点，可检测粪便、呕吐物等样本中的人星状病毒核酸。人星状病毒是引发婴幼儿病毒性腹泻的主要病原之一，传播性强，试剂盒检测快速高效、特异性强，不与轮状病毒、诺如病毒等腹泻病毒交叉反应，适用于儿科腹泻病原筛查、托育机构疫情防控、食源性腹泻溯源及肠道病毒监测工作。

基础原理：

靶标星状病毒衣壳蛋白基因，染料法 RT-PCR 扩增，依靠熔解曲线 Tm 值特异性鉴别星状病毒。

粪便样本稀释后高速离心去除固体残渣，上清提取病毒 RNA，规避食物残渣抑制扩增。

扩增完成后凝胶电泳观测特异性目的条带，出现目标大小条带判定阳性，适配基础 PCR 实验室。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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