心病毒(SAFV)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒针对心病毒特异性基因序列研发荧光PCR检测体系，可快速检测人体临床样本、环境样本中的心病毒核酸。心病毒易引发人体心肌炎、呼吸道感染、神经系统感染等病症，多发于儿童及免疫力低下人群，试剂盒检测灵敏度高、特异性优异，可精准识别心病毒，规避其他呼吸道、肠道病毒干扰，适用于临床未知感染病原排查、儿童感染性疾病筛查及病毒流行病学研究。

基础原理：

靶向心病毒 3D 聚合酶保守基因，特异性 RT-qPCR，不与肠道病毒、鼻病毒发生交叉扩增。

细胞培养液、粪便样本经异丙醇沉淀病毒 RNA，去除多糖、蛋白杂质提升扩增效率。

梯度 RNA 标准品构建标准曲线，定量样本内心病毒病毒载量，辅助判断感染严重程度。

‌操作步骤‌：

DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA，确保无抑制剂残留。

标准曲线制备（样本制备区）

标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用带滤芯枪头）。

梯度稀释阳性对照：

7号管：加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品；

依次稀释至2号管，最终浓度跨5个数量级（1×10^7至1×10^3拷贝/μL）。

所有标准品置于冰上备用，避免反复冻融。

试剂配制（试剂准备区）

反应液避光解冻后涡旋混匀，短暂离心分装至PCR管。

每反应体系20 μL，含预混引物、荧光染料及缓冲液。

加样（样本处理区）

分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管，阴性对照以DEPC-H2O替代。

盖紧管盖，避免气泡干扰。

PCR扩增（核酸扩增区）

按以下程序运行定量PCR仪：

预变性：95℃ 2分钟；

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析（可选）。

‌注意事项‌：

试剂盒含生物源性质粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，阳性模板仅在生物安全柜开盖；

所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃；

试剂避免反复冻融，单次融化冰上放置不超过 2 h，使用完毕立即放回 - 20℃；

移液器吸头一次性使用，禁止重复吸取，防止交叉污染；

试剂盒仅用于科研检测，严禁人临床体外诊断；

扩增产物区产物不可带回试剂、提取区，防止气溶胶大面积污染实验室；

若阴性对照持续出现杂带，全部更换全新试剂盒，实验室台面、移液器紫外过夜消毒。

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