肠道病毒EV型(EV-)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒采用广谱荧光PCR检测技术，靶向肠道病毒通用保守基因区域设计引物探针，可定性检测咽拭子、粪便、疱疹液样本中的各类EV型肠道病毒核酸。肠道病毒可引发手足口病、疱疹性咽峡炎、病毒性肠炎等多种疾病，试剂盒覆盖常见肠道病毒亚型，特异性强、检测快速，适用于儿童群体性感染筛查、临床肠道病毒感染诊断、突发疫情应急检测及流行病学监测。

基础原理：

靶向肠道病毒 5’UTR 高度保守区，一步法逆转录荧光 PCR，同步完成 RNA 逆转录与靶基因扩增，覆盖全部 EV 血清型。

咽拭子、粪便样本裂解后直接作为模板，无需 RNA 沉淀纯化，缩短检测流程。

双通道荧光通道，EV 靶标通道阳性判定肠道病毒感染，人源内参确认样本采集合格。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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