人类白细胞抗原（HLA-B）核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒基于荧光PCR基因分型技术，靶向人类白细胞HLA-B基因特异性位点设计检测体系，可对人体外周血样本中的HLA-B基因进行核酸检测与分型。HLA-B基因与器官移植配型、疾病易感、免疫遗传密切相关，试剂盒检测准确率高、分型清晰、重复性好，适用于临床器官移植、造血干细胞移植配型、遗传病筛查、免疫相关性疾病研究及人类基因多态性分析。

基础原理：

靶向 HLA-B 基因外显子 2、3 高多态性区域，特异性引物扩增全长多态片段，用于基因分型测序前模板制备。

外周血白细胞经氯化铵裂解液去除红细胞，沉淀白细胞后柱提法纯化人基因组 DNA。

扩增产物直接荧光标记，毛细管电泳读取片段峰型，匹配数据库完成 HLA-B 等位基因分型判定。

‌操作步骤‌：

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。

2. 标准曲线制备（独立操作区）

标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。

取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。

3. PCR反应体系配制（试剂配制区）

按以下比例配制（示例）：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| DEPC水 | 6 |

4. 上机检测

程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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