乙型肝炎病毒ccc DNA(HBV-cccDNA)核酸检测试剂盒 新品

本试剂盒针对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（cccDNA）特异性靶点研发专属荧光PCR检测体系，可精准检测肝组织及相关临床样本中的HBV-cccDNA。cccDNA是乙肝病毒持续感染、复发的核心根源，传统检测难以精准识别，本试剂盒特异性极强，可有效区分病毒松弛环状DNA与cccDNA，检测精准度高，适用于乙肝患者病情评估、抗病毒疗效监测、停药复发风险预判及乙肝发病机制研究。

基础原理：

采用选择性核酸酶消化法，降解松弛环状 rcDNA，仅保留共价闭合环状 cccDNA 作为模板，特异性扩增 cccDNA 保守区段。

肝细胞组织样本经蛋白酶 K 充分消化细胞骨架，释放细胞核内 cccDNA，低盐洗脱纯化完整环状核酸。

高亲和力 Taqman 探针靶向 cccDNA 独特缺口连接序列，仅完整环状 DNA 可结合探针产生荧光，区分 rcDNA 干扰。

‌操作步骤‌：

RNA提取：使用配套试剂或商业试剂盒提取样品RNA。

反应配制：按说明书比例混合预混液、引物探针、模板RNA及对照。

PCR扩增：

预变性：95℃ 2分钟；

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40个循环），于FAM通道采集信号。

结果分析：通过Ct值判定病毒含量，阳性对照需出现典型扩增曲线，阴性对照无信号。

‌注意事项‌：

试剂盒含生物源性质粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，阳性模板仅在生物安全柜开盖；

所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃；

试剂避免反复冻融，单次融化冰上放置不超过 2 h，使用完毕立即放回 - 20℃；

移液器吸头一次性使用，禁止重复吸取，防止交叉污染；

试剂盒仅用于科研检测，严禁人临床体外诊断；

扩增产物区产物不可带回试剂、提取区，防止气溶胶大面积污染实验室；

若阴性对照持续出现杂带，全部更换全新试剂盒，实验室台面、移液器紫外过夜消毒。

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