玉米BT PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒专门针对玉米BT抗虫基因设计特异性PCR扩增体系，可定性检测玉米种子、籽粒、秸秆及玉米加工制品中的BT转基因成分。试剂盒特异性强，仅靶向BT基因序列扩增，无交叉非特异性反应，灵敏度高，可检出微量转基因掺杂成分，操作标准化、检测快速，是转基因玉米筛查、农产品质量检测、种子转基因纯度核验、食品转基因成分监管的专用检测试剂。

基础原理：

粉碎玉米籽粒、植株组织，提取纯化植物基因组 DNA。

特异性引物靶向 Bt 杀虫蛋白外源插入基因，仅转基因玉米可扩增。

凝胶电泳出现 Bt 基因特征条带，判定样本含 Bt 转基因玉米。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

1、实验分区管理‌

实验全程需严格划分三个独立区域：‌试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区‌，各区实验服、移液器及耗材‌严禁混用‌，防止交叉污染。

‌2、防止污染操作‌

使用带滤芯枪头，每步更换枪头；

阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；

加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。

‌3、试剂保存与使用‌

所有试剂需‌-20℃避光保存‌，避免反复冻融，确保稳定性；

使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。

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