乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异（RT和RT位点）PCR测定试剂盒

本试剂盒针对乙型肝炎病毒阿德福韦耐药相关RT基因特定位点变异设计专属检测体系，通过位点特异性PCR扩增技术，精准识别乙肝病毒RT位点耐药突变序列。产品可精准区分野生型毒株与阿德福韦耐药突变毒株，检测位点精准、特异性高、结果可靠，能够快速判定患者病毒耐药情况，适用于乙肝患者抗病毒治疗耐药性监测、临床用药指导、个体化治疗方案制定及病毒耐药变异流行病学研究。

基础原理：

提取患者血清 HBV-DNA，纯化后作为模板扩增逆转录酶 RT 基因全长片段。

引物精准覆盖阿德福韦耐药突变位点，扩增包含突变区域的完整基因片段。

扩增产物测序或酶切分型，比对序列判断是否存在对应耐药位点突变。

‌操作步骤‌：

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。

2. 标准曲线制备（独立操作区）

标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。

取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。

3. PCR反应体系配制（试剂配制区）

按以下比例配制（示例）：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| DEPC水 | 6 |

4. 上机检测

程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。

‌注意事项‌：

1、实验分区管理‌

实验全程需严格划分三个独立区域：‌试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区‌，各区实验服、移液器及耗材‌严禁混用‌，防止交叉污染。

‌2、防止污染操作‌

使用带滤芯枪头，每步更换枪头；

阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；

加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。

‌3、试剂保存与使用‌

所有试剂需‌-20℃避光保存‌，避免反复冻融，确保稳定性；

使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。

公司正在出售的产品：