嗜水气单胞菌PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒针对水产与环境常见致病菌嗜水气单胞菌设计专属PCR检测体系，靶向其特异性保守基因进行扩增检测，可精准识别该致病菌核酸。试剂盒特异性好，可规避水产养殖中常见其他细菌的干扰，灵敏度高，适配水体、水产动物病灶组织、养殖底泥等复杂样本，主要用于水产养殖病害预警、水环境安全检测、食品微生物风险筛查等场景。

基础原理：

水产养殖水体、鱼体病灶组织裂解，提纯嗜水气单胞菌基因组 DNA。

引物靶向该菌气溶素毒力基因，特异性识别致病菌核酸模板。

电泳观察特异性扩增条带，快速筛查水产样本致病菌污染。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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