沙门氏菌PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒采用广谱特异性PCR扩增技术，靶向沙门氏菌属通用保守基因设计检测体系，可高效识别各类常见沙门氏菌菌株核酸。试剂盒体系经过优化，抗样本干扰能力强，检出限低、特异性优异，无交叉菌群干扰，可快速完成食品、农产品、水体、临床样本中沙门氏菌的定性筛查，广泛应用于食品安全质检、公共卫生监测及微生物检测领域。

基础原理：

前处理样本去除油脂、蛋白等 PCR 抑制物，纯化细菌总核酸模板。

选用沙门氏菌属共有特异性基因引物，实现属内所有菌株通用扩增。

扩增产物电泳成像，特征条带出现判定沙门氏菌阳性样本。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染

无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服

试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心

避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作

防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台

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