甲型肝炎病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒采用反转录PCR技术，特异性扩增甲型肝炎病毒核酸，可对人体血清、粪便及环境样本中的甲肝病毒进行检测。能够实现甲肝病毒早期感染筛查，有效规避血清学检测窗口期缺陷，特异性强、结果精准，适用于临床甲型肝炎的病原学诊断、食品水源甲肝病毒污染监测、流行性甲肝疫情流行病学调查。

基础原理：

引物靶向甲肝病毒 VP1 衣壳蛋白基因保守区段，毒株序列保守，检测覆盖范围广。

提取患者粪便、血清病毒 RNA 反转录得到 cDNA，再 PCR 扩增实现早期感染检测。

设立阴性粪便样本对照，排除粪便复杂杂质对扩增反应的抑制作用。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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