汉坦病毒Ⅰ型PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒基于PCR扩增技术，特异性识别汉坦病毒Ⅰ型专属基因序列，可对人体血液、痰液及鼠类宿主样本中的病毒核酸进行定性检测。汉坦病毒Ⅰ型致病性较强，本试剂盒可实现早期隐匿性感染检出，特异性强、无交叉干扰，适用于临床肾综合征出血热早期诊断、疫区宿主动物带毒监测及流行病学溯源调查。

基础原理：

引物靶向 Ⅰ 型汉坦病毒 S 片段核蛋白基因独有序列，可精准区分 Ⅰ 型与其他汉坦病毒。

提取患者血清、鼠类脏器病毒 RNA，反转录后 PCR 扩增放大病毒核酸检测信号。

配套 Ⅰ 型病毒阳性质控品，用于验证试剂盒分型扩增的特异性与灵敏度。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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