副结核分枝杆菌PCR检测试剂盒

本试剂盒基于PCR分子扩增技术，靶向扩增副结核分枝杆菌特异性核酸片段，可对牛羊等反刍动物的粪便、血液、病变组织等样本进行病原检测。该病原菌培养难度大、周期长，本试剂盒可实现快速精准检出，有效解决传统检测方法的短板，特异性高，可区分结核分枝杆菌与副结核分枝杆菌，适用于畜禽副结核病的早期筛查、隐性感染排查及养殖场疫病净化工作。

基础原理：

引物靶向副结核分枝杆菌 IS900 插入序列，该序列在菌株基因组中多拷贝存在，检测灵敏度优异。

提取牛羊粪便、肠组织样本病原菌 DNA，通过 PCR 扩增完成副结核病病原分子筛查。

与结核分枝杆菌阴性对照同步试验，区分两种分枝杆菌，防止结果混淆误判。

‌操作步骤‌：

RNA提取：使用配套试剂或商业试剂盒提取样品RNA。

反应配制：按说明书比例混合预混液、引物探针、模板RNA及对照。

PCR扩增：

预变性：95℃ 2分钟；

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40个循环），于FAM通道采集信号。

结果分析：通过Ct值判定病毒含量，阳性对照需出现典型扩增曲线，阴性对照无信号。

‌注意事项‌：

试剂禁止反复冻融，分装为小体积 - 20℃保存，融化后冰上放置不超过 2 h

所有耗材必须无 DNase/RNase，吸头一次性使用，废液、废弃 PCR 管 121℃高压灭菌后丢弃

阳性质粒高拷贝，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

试剂盒仅限科研检测，禁止人、临床样本检测

试剂盒过期、试剂浑浊、变色禁止使用

若大量样本出现阴性对照带污染，立即更换全新试剂盒，彻底紫外消毒实验台面、移液器

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