肺炎支原体PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒依托传统PCR扩增技术，针对肺炎支原体特异性基因设计专属引物，可对人体呼吸道样本中的肺炎支原体核酸进行定性检测。产品体系稳定性优异，扩增效率稳定，批间、批内检测差异小，能够精准区分肺炎支原体与其他呼吸道致病菌，解决传统培养法检测周期长、检出率低的问题，适用于儿科、呼吸科常见支原体肺炎的快速病原筛查与临床辅助诊断。

基础原理：

引物选取肺炎支原体 16S rRNA 基因特异可变区，可精准区分肺炎支原体与人型支原体等近缘支原体。

提取患者咽拭子、肺泡灌洗液病原体 DNA，经热循环扩增扩增靶基因片段，实现早期感染筛查。

通过设置近缘微生物阴性对照，消除呼吸道共生微生物同源序列带来的扩增干扰。

‌操作步骤‌：

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。

2. 标准曲线制备（独立操作区）

标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。

取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。

3. PCR反应体系配制（试剂配制区）

按以下比例配制（示例）：

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| DEPC水 | 6 |

4. 上机检测

程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。

数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。

‌注意事项‌：

1、实验分区管理‌

实验全程需严格划分三个独立区域：‌试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区‌，各区实验服、移液器及耗材‌严禁混用‌，防止交叉污染。

‌2、防止污染操作‌

使用带滤芯枪头，每步更换枪头；

阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；

加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。

‌3、试剂保存与使用‌

所有试剂需‌-20℃避光保存‌，避免反复冻融，确保稳定性；

使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。

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