抗亚碲酸盐大肠杆菌:型PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒针对抗亚碲酸盐大肠杆菌特异性耐药基因及保守核酸序列设计PCR扩增体系，可精准检测食品、水体、动物粪便及临床样本中的该类耐药大肠杆菌核酸。试剂盒可快速鉴别耐药菌株与普通大肠杆菌，特异性无交叉反应，检测效率高，适用于食品卫生检测、养殖环境菌群监测、临床耐药菌感染筛查及公共卫生安全监测。

基础原理：

分离培养或直接裂解样本细菌，提取抗亚碲酸盐大肠杆菌基因组 DNA；

引物扩增该菌株携带的抗亚碲酸盐相关耐药基因特异性片段；

扩增出目标片段即可证明样本含有该耐药表型大肠杆菌。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带

阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室

所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃

试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用

仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景

土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰

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