狂犬病病毒街毒株PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒专为狂犬病病毒野生街毒株核酸检测研发，依托特异性PCR扩增技术，靶向识别街毒株特有基因保守区段，可精准检测动物及临床样本中的野生狂犬病病毒毒株，排除固定毒株及其他相近病毒的交叉干扰。试剂盒操作简便、检测周期短，能够实现疑似感染样本的快速筛查与确诊，适用于动物疫病监测、临床病例溯源、野外毒株流行病学调查等工作，为狂犬病疫情防控与风险研判提供精准的分子诊断依据。

基础原理：

试剂盒内置针对狂犬病病毒街毒株独有基因区段设计的特异性引物，可区分街毒株与实验室固定毒株核酸序列。

提取样本中病毒核酸作为扩增模板，经 PCR 热循环反复扩增目标片段，提升低载量病毒样本的检出能力。

借助核酸扩增后的信号结果，判断待测样本是否被野外流行的狂犬病街毒株感染。

‌操作步骤‌：

样本制备：

使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。

建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。

反应体系配制（20 μL体系示例）：

预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）

特异性引物混合液

模板DNA（2~5 μL）

补充无核酸酶水至终体积。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。

结果判读：

阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；

阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；

可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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