牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒

本试剂盒基于细菌特异性基因扩增技术，靶向牙龈卟啉单胞菌专属保守基因，可精准定性检测样本中的该致病菌核酸，特异性强，可有效区分其他口腔致病菌。试剂盒检测灵敏度高，可检出微量菌源核酸，适配口腔拭子、牙周组织等样本，检测速度快、结果精准。主要用于畜禽及动物口腔感染疫病诊断、牙周致病菌溯源、临床微生物检测及相关细菌耐药性、致病机制科研研究。

基础原理：

提取牙周拭子样本细菌基因组 DNA，去除唾液中黏蛋白等 PCR 抑制物。

引物靶向牙龈卟啉单胞菌毒力因子 kgp 基因，仅扩增该菌种特异性片段。

扩增产物荧光信号阳性即可证明样本存在该致病菌，用于牙周病病原检测。

‌操作步骤‌：

样本处理（样本处理区）

推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。

试剂配制（试剂准备区）

反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。

PCR扩增（核酸扩增区）

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）；

扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。

结果分析

阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；

阴性：无Ct值或曲线平直；

可疑：40<Ct≤45，需复测确认。

质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。

‌注意事项‌：

所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；

阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；

试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；

废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；

试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；

移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。

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